文献解读

RayBiotech抗体芯片在肿瘤耐药性研究中的应用

时间:2015-05-19 作者:技术部 来源:本站 浏览:2425

 

RayBiotech抗体芯片在肿瘤耐药性研究中的应用 

杂志名称:  Cancer Cell(IF 23.893 )

文献:Lee H J, Zhuang G, Cao Y, et al. Drug resistance via feedback activation of Stat3 in oncogene-addicted cancer cells[J]. Cancer cell, 2014, 26(2): 207-221.(download)

本实验所用产品RayBiotechAAH-BLM-1抗体芯片

507个生长、趋化、血管、炎症等细胞因子抗体芯片)

实验样品:细胞上清

 

研究背景:

 由于出现抵抗药物的细胞,所以途径靶向抗癌药的作用会受到限制。癌基因依赖型肿瘤细胞在药物处理下形成正循环激活STAT3,从而促进细胞存活以及限制药物作用。这种作用在肿瘤细胞中由多种活化激酶例如EGFRHER2ALKMET,以及突变体KRAS等驱动。MEK的抑制作用导致了通过FGF受体和JAK激酶的Stat3自分泌激活, MEKJAKFGFR的药理抑制增强肿瘤消退。这些发现表明,抑制Stat3的反馈回路可以增加途径靶向抗癌广谱药的有效作用。

研究思路

实验方法

1.1           样品准备  

l  人肺腺癌细胞 PC-9(EGFR 激活突变型);

l  DMSOErlotinib EGFR激酶特异性抑制剂)分别刺激72h后收集细胞上清;

1.2            肿瘤细胞的活性检测

   细胞活性检测结果表明,用Erlotinib药物处理过的PC-9肿瘤细胞培养上清会诱导PC-9细胞产生耐药性。

 
 

1.3            RayBiotech细胞因子抗体芯片检测细胞培养上清样品中507个细胞因子的表达及其差异

DMSOErlotinib分别刺激PC-9细胞,72h后收集细胞上清,浓缩后进行抗体芯片检测结果显示, Galectin-3ErbB3EDA-A2等十几种细胞因子在Erlotinib药物处理细胞上清中表达量升高,可能是这些因子促进了PC-9细胞的耐药性产生。其中IL-6IL-1aGalectin-3是能够激活Stat3通路的关键因子。

  

 
 

 

1.4           转录因子通路报告基因检测

转录因子通路报告基因检测结果显示,短暂的(3h)药物刺激并没有引起任何显著改变,而24h后发生显著变化,这表明药物刺激响应不是立即激活EGFR下游,而可能是通过反馈活化的过程完成。

 
 

1.5           MEK抑制引起的Stat3反馈回路示意图

后续通过WB检测、基因芯片分析以及肿瘤移植研究,推测出MEK抑制引起的Stat3反馈回路。

 

 

2       结论

该研究揭示了一个细胞保护反馈机制,该反馈机制是由抑制肿瘤细胞的MEK信号通路引起的。该发现对肺癌的联合治疗有非常潜在的应用价值。RayBiotech抗体芯片在该研究中起到非常重要的指引作用,有助于深层次挖掘分子机制。

 

本文使用RayBiotech AAH-BLM-1 细胞因子抗体芯片