文献解读

RayBiotech抗体芯片在肿瘤研究中的应用

时间:2015-05-19 作者:技术部 来源:本站 浏览:2206

 

RayBiotech抗体芯片在肿瘤研究中的应用




杂志名称:  PNAS《美国科学院院报》(IF 9.809)

文献题目:Inhibition of tumor cell proliferation and motility by fibroblasts is both contact and soluble factor dependent(download)

本实验所用产品:RayBiotech人AAH-BLM-1抗体芯片

(507个生长、趋化、血管、炎症等细胞因子抗体芯片

实验样品:细胞上清

研究背景:

    正常人和小鼠成纤维细胞在体外与肿瘤细胞共培养时可以抑制肿瘤细胞的生长,且抑制的能力与成纤维细胞的供体和纤维母细胞的起源部位有关。以往的实验说明要在成纤维细胞形成单细胞层后接种肿瘤细胞才有会起到有效的抑制作用。本研究发现成纤维细胞是抑制肿瘤细胞的活性,抑制作用依赖于两种分子,一种是细胞基质和细胞表面的蛋白,另外一种是成纤维细胞与肿瘤细胞共培养时分泌的因子。本文用抗体芯片筛选了成纤维细胞单独培养细胞上清和与肿瘤细胞共培养的细胞上清,筛查到非常多有意义的差异因子。

研究思路

实验方法

1.1 样品准备

  成纤维细胞,前列腺癌细胞株PC3;

1.2 将两种细胞进行分别培养及共培养;

1.3 肿瘤细胞的活性检测和增殖能力检测;

1.4 RayBiotech抗体芯片筛选不同培养上清中生物标志物的差异; 

2 结果

2.1 共培养上清抑制肿瘤的生长

 活性检测和增殖能力检测结果表明,成纤维细胞与肿瘤细胞共培养的细胞上清可以显著抑制肿瘤细胞的活性及增殖能力,而成纤维细胞单独培养的细胞上清则没这种能力。如下图所示,通过采用不同颜色标记不同时间段的肿瘤,再将颜色进行叠加,可以看到肿瘤的生长受到了抑制。

  

 

 

  

2 .2 RayBiotech芯片筛查不同情况下上清的相关蛋白变化

 

507抗体芯片检测结果显示,MMP3是在共培养中成纤维细胞分泌降低的唯一蛋白,其他的8个蛋白GDF-15、DKK1、EMAP-II、EDA-A2、CXCL2、uPA、Nidogen1、Galectin-3在共培养中成纤维细胞分泌增高。

 

  

  

 2.3  推测抑制作用的分子机制

对肿瘤细胞的增殖和活性的抑制作用需要两个关键因素,首先,第一个关键因素是结构分子(表面受体和ECM),成纤维细胞形成单细胞层后接种肿瘤细胞共培养,两种细胞产生接触才会有抑制作用;其次,第二个关键因素是成纤维细胞和肿瘤细胞共培养相互作用后分泌的可溶性因子起到抑制肿瘤细胞生长的作用。
 
   

结论

肿瘤微环境以及肿瘤抑制作用一直是研究热点,RayBiotech抗体芯片在该研究中起到非常重要的指引作用,有助于进一步深层次挖掘分子机制。


 
本文使用Raybiotech AAH-BLM-1 抗体芯片