细胞磁分选方案大全

本文以美天旎MACS磁珠为例,汇总细胞磁分选的各种方案。

MACS磁珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,用于在高强度磁场、梯度磁场中对细胞磁性分离。

磁珠仅50nm,是细胞体积的百万分之一,标记少,仅占细胞表位20%-30%,最大程度避免细胞活化,同时兼容下游流式分析。

MACS磁珠主要有3种:

  1. 直标磁珠:磁珠通过偶联的抗体,直接磁性标记细胞;

  2. 间标磁珠:3大类,抗荧光素磁珠、抗生物素磁珠、抗免疫球蛋白磁珠

    间标磁珠几乎可以分选任意物种的任意细胞类型。

抗荧光素磁珠

目录号

名称

总细胞

130-097-054

Anti-PE Microbeads, lyophilized(干粉)  推荐!

1 X 109

130-048-801

Anti-PE Microbeads

1 X 109

130-097-143

Anti-APC Microbeads, lyophilized(干粉)

1 X 109

130-090-855

Anti-APC Microbeads

1 X 109

130-097-050

Anti-FITC Microbeads, lyophilized(干粉)

2 X 109

130-048-701

Anti-FITC Microbeads

2 X 109

130-091-395

Anti-Cy5/Anti-Alexa Fluor 647 Microbeads

1 X 109

130-091-652

Anti-Cy7 Microbeads

1 X 109

 

抗生物素磁珠和链霉亲和素磁珠

目录号

名称

总细胞

130-097-046

Anti-Biotin Microbeads, lyophilized(干粉)

1 X 109

130-090-485

Anti-Biotin Microbeads

1 X 109

130-048-102

Streptavidin MicroBeads

1 X 109

 

抗免疫球蛋白磁珠

目录号

名称

总细胞

130-048-401

Anti-Mouse IgG(H+L)-Microbeads

1 X 109

130-047-101

Anti-Mouse IgG1- Microbeads

1 X 109

130-047-201

Anti-Mouse IgG2a+b- Microbeads

1 X 109

130-047-301

Anti-Mouse IgM Microbeads

1 X 109

130-047-501

Anti-Rat IgG(H+L) Microbeads

1 X 109

130-048-602

Anti-Rabbit IgG(H+L)- Microbeads

5 X 109

130-047-401

Anti-Rat Kappa Microbeads

1 X 109

 

多选磁珠:磁珠通过偶联的抗体直接磁性标记,又可通过酶催化反应,从抗体解离磁珠。

 

磁分选方案汇总:

  1. 磁珠直接标记目的细胞,过分选柱,洗脱收集分选柱中的磁性标记目的细胞

  2.  

  3. 磁珠直接标记非目的细胞,过分选柱,收集流下来的没有被标记的目的细胞

     

     

  4. 利用一抗和间标磁珠,标记多种非目的细胞,过分选柱,收集流下来的untouched目的细胞

     

  5. 如目的细胞和非目的细胞有同一种marker, 一次阳选不能搞定,需要先特异标记非目的细胞(非目的细胞特有的marker),过柱去除磁标记的非目的细胞,收集留下来的含有目的细胞的溶液,再用目的细胞常见marker标记目的细胞,过分选柱,洗脱收集目的细胞。

     

     

  6. 利用基因工程重组抗体结合间标磁珠,形成多聚复合体,对细胞具有特异性高亲和力,从而实现对目的细胞表面磁性标记,过分选柱,洗脱,收集磁性标记的目的细胞,再用REAlease Bead Release Reagent去除细胞表面磁珠。如果需要untouched细胞,可以用REAlease Release Reagent去除细胞表面标记,后续如有需要,可进一步做标记分选。

     

     

  7. 多参数细胞分选,基于不同的细胞marker 进行的2步依次阳选。首先第一次磁性标记阳选后,过柱洗脱收集阳选的磁性标记细胞,用 MultiSort Release Reagent去除第一次的磁性标记,这样目的细胞又可以二次用磁珠直接标记,进行二次阳选

  8.  

     

 

创建时间:2022-05-23 15:22
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