做细胞凋亡周期实验，就pick它！
细胞凋亡是指在一定的生理或者病理条件下，细胞主动的、高度有序的、自己结束生命的过程。检测细胞凋亡的方法有很多，如形态学、annexin V/PI（或7-AAD）双染法、线粒体损伤检测、TUNEL法等，其中annexin V/PI双染法是最常见的检测细胞凋亡的方法。
① 产品介绍
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此，可以采用Annexin V与PI或7-AAD双染的方法，通过流式检测细胞早期凋亡。
② 应用
此类试剂盒主要用于检测细胞早期凋亡
③ 实验结果图
④ 产品特点
荧光种类较全，满足不同实验不同仪器的需求
Alexa Fluor®荧光的优点：
亮度 — Alexa Fluor® 染料相比其他染料荧光更强；
光稳定性 — Alexa Fluor® 染料相比其他染料光稳定性更强，提供更长的图像捕获时间；
仪器兼容性 — Alexa Fluor® 染料的吸收光谱与普通激发光源的主要输出波长相匹配；
多种颜色 — Alexa Fluor® 染料有蓝色到红色的多种直接荧光；
pH值不敏感 — Alexa Fluor® 染料在一个广泛的pH范围内保持强荧光；
水溶性 — Alexa Fluor® 染料有良好的水溶性, 无需有机试剂即可结合蛋白, 且储存不易产生沉淀。
操作时间短，染色后不需要清洗离心步骤，节省时间
Alexa Fluor® 647与PI共染不需要调节补偿
现货充足，性价比高
注：Alexa Fluor®系列荧光染料为Thermo Fisher公司专利产品
① 产品介绍
细胞凋亡经常伴随有线粒体的损伤，而线粒体的损伤会表现为线粒体膜电位下降，JC-1和JC-10是常用的检测线粒体膜电位的荧光探针。以JC-10为例，正常细胞内，JC-10选择性聚集在线粒体基质中形成可逆的红色荧光聚合物；而细胞发生凋亡时，由于膜电位的下降，JC-10由多聚体转变为单体形式存在于胞浆中，产生绿色荧光。JC-10不仅可用于定性检测，因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测，因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。
② 应用
JC-1和JC-10可用于流式细胞仪、荧光显微镜和荧光酶标仪等实验技术分析细胞凋亡
③ 产品特点
相较于JC-1，JC-10具有更多的优点：
良好的水溶性
操作简单，省时。
信号强，良好信噪比
误差小，良好的结果一致性
Caspases属于半胱氨酸蛋白酶类，其活性位点均含有半胱氨酸残基，能够对靶蛋白天冬氨酸残基上的肽键进行特异性切割。该酶受到激活引发后续相关蛋白的裂解是细胞发生凋亡的关键环节。
Detection of Cleaved Caspase-3 in Jurkat Human Cell Line by Flow Cytometry. Jurkat human acute T cell leukemia cell line untreated (open histogram) or treated with 3 μM Staurosporine for 3 hours (filled histogram) was stained with Rabbit Anti-Human/Mouse Caspase-3 Monoclonal Antibody (Catalog # MAB835, filled histogram) followed by anti-Rabbit IgG FITC-conjugated secondary antibody (Catalog # F0112). To facilitate intracellular staining, cells were fixed with Flow Cytometry Fixation Buffer (Catalog # FC004) and permeabilized with 90% methanol.
细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体DNA的降解，这是一个较普遍的现象。TUNEL法，应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶 (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)在凋亡细胞断裂DNA的3´-OH末端催化掺入荧光偶联的dUTP。荧光偶联的dUTP 标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪检测。适用于组织样本（石蜡切片，冰冻切片）或细胞。TUNEL法可以选择性的检测凋亡细胞，而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的DNA链断裂的细胞。
在进行细胞凋亡实验时，往往需要做阳性对照，即需要用凋亡诱导试剂诱导凋亡的产生，来评估实验模型的凋亡水平，可以与上述提到的凋亡检测试剂搭配使用。
PI为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸 DNA 和RNA 双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与 DNA 的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的 DNA 分布状态，从而计算出各个期的百分含量。
