Proteinatlas数据库修炼手册
Proteinatlas数据库修炼手册
生物学知识体系庞大且复杂,蛋白质种类成千上万,文献浩如烟海,很难找到合适的参考文献。
当boss下达任务,要求研究xx蛋白时,我们的第一反应:
这个蛋白是个什么玩意儿?
会在什么细胞中表达?
表达在什么部位?
有没有可参考的免疫组化或蛋白印迹阳性对照?
所谓磨刀不误砍柴工,这些基本信息都是需要提前获知的。然而,面对茫茫文献,我们往往无从下手。

别急,下面我来介绍一款蛋白质数据库神器,助您“实”半功倍!

这个数据库就是Human Protein Atlas
传送门:https://www.proteinatlas.org/

Human Protein Atlas(HPA)提供了两万多种人类蛋白质的组织和细胞分布信息。在数据库中,研究人员通过免疫检测技术(免疫印迹、免疫荧光和免疫组化),检测了每一种蛋白在不同细胞系、正常组织和肿瘤组织中的表达情况。
HPA数据库可以分为Subcellular、Tissue和Pathology三个版块,分别展示了蛋白在细胞、正常组织和肿瘤组织中的表达情况。我就以肿瘤常见的标记物p53为例,向大家简单介绍HPA数据库的使用。
打开传送门:https://www.proteinatlas.org/
在搜索框中输入p53,点击search。

第一栏就是我们查询的目标蛋白p53,我们分别以Subcellular、Tissue和Pathology三个版块介绍使用方法。
板块一:Subcellular

点击图中绿色的Subcellular进入。此版块共分7个部分,即SUBCELLULAR、RNA EXPRESSION、HUMAN CELLS、SINGLE CELL VARIATION、siRNA、GENE/PROTEIN和ANTIBODIES AND VALIDATION,详细介绍了p53的相关信息。

1. SUBCELLULAR
这一栏列出了p53的基本情况:基因名(TP53)、蛋白性质、表达位置、转录子数量等。细胞结构图展示了p53蛋白在细胞内的分布,表达处显示为绿色。

2. RNA EXPRESSION
这一栏介绍了p53在69种不同细胞系中的RNA表达情况。这些RNA表达情况按照Organ、Origin、Category、Expression和Alphabetical等方法进行分类。比如在Organ分类下,p53在REH细胞(人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞)中RNA表达水平最高。

3. HUMAN CELLS
这一栏具体显示了p53在细胞中的空间分布。使用免疫荧光的方法分别检测p53在A-431、U-2 OS和U-251 MG细胞中的分布情况。

并且还提供了多种抗体在不同细胞中的染色结果:

点击HPA051244抗体在A-431细胞中的荧光表达图,
可以清晰显示p53在细胞中的分布。通过选择不同
的通道(如Target protein、Nucleus、Microtubules、ER)为参照,精确定位p53在细胞内的空间分布。

4. SINGLE CELL VARIATION
这一栏主要介绍了单细胞变异的情况,通过间接免疫荧光实验检测U-2 OS细胞的RNA表达和蛋白表达揭示了蛋白质表达的变化与细胞周期相关,而转录本变异与细胞周期无关。


5. siRNA
这一栏展示了使用siRNA介导的基因表达下调后,再通过免疫荧光确定细胞的定位。亦可以通过选择不同的通道(如Target protein、Nucleus、Microtubules、ER)为参照,精确定位p53在细胞内的空间分布。

6. GENE/PROTEIN
这一栏主要介绍了p53的基本信息,与第一栏SUBCELLULAR信息基本一致。此外还提供了一些有用的链接,如Uniprot(https://www.uniprot.org/)可以快速查询p53的其它关键信息:氨基酸序列、长度、蛋白功能和二、三级结构等。

7. ANTIBODIES AND VALIDATION
这一栏展示的信息与HUMAN CELLS差不多,主要介绍了用于验证p53表达的抗体信息。可以获知抗体信息、免疫细胞结果、免疫组化结果、WB结果、蛋白序列、相关文献、抗原信息等。

注:部分抗体可能已经下架,目录号仅供参考
总结
“Subcellular”版块主要提供了细胞的蛋白表达情况,其中比较关键的信息是蛋白在不同细胞、以及同一细胞内的空间分布情况,这些数据以免疫检测实验结果展示,为后续实验参考提供了极大的便利。
关于Subcellular的介绍先到这里,后续将会为大家带来蛋白在Tissue和Pathology中的表达情况查询。
欲知下文详解,请关注我们哦!
