抗体芯片在干细胞治疗阿尔茨海默病研究中的应用

杂志名称：Advanced Science

影响因子：15.840

文献题目：HGF mediates clinical-grade human umbilical cord-derived mesenchymal stemcells improved functional recovery in a senescence-accelerated mouse model of Alzheimer’s disease.

第一作者：贾雅丽

通讯作者：裴雪涛；岳文

作者单位：1．军事科学院军事医学研究院

2．华南干细胞与再生医学研究所

3．解放军联勤保障部队920医院

本实验所用产品：AAH-CYT-G2000（可同时检测174个人类细胞因子的半定量玻璃芯片）

研究背景:

阿尔茨海默病(AD)是一种以神经元丢失和认知功能下降为特征的进行性神经退行性疾病。AD患者的大脑会出现两个标志性病变：β-淀粉样蛋白斑块和神经纤维缠结。目前，AD治疗方法都仅针对症状，无法延缓疾病病程。在前期，该团队首次发现人脐带来源的间充质干细胞（hUC-MSCs）能一定程度改善老化大脑的认知能力（PMID：28796260）。

1 结果

1.1 Huc-MSCs可改善SAMP8小鼠的认知功能

将hUC-MSCs移植到AD衰老加速模型SAMP8小鼠体内，行为学测试结果显示hUC-MSCs移植能显著改善小鼠的认知功能。

1.2 Huc-MSCs可调节AD相关关键蛋白表达及促进AD小鼠内源性神经再生

Huc-MSCs可显著降低AD相关关键蛋白（p-Tau、BACE1、Pgsk3β、β-APP和PS1）的表达，从而减轻神经元损伤。并且，Huc-MSCs能够激活内源性神经发生，从而有利于稳定海马神经网络。

1.3 Huc-MSCs修复冈田酸诱导的AD细胞损伤

在体外AD细胞模型中，hUC-MSCs能有效地恢复和挽救冈田酸对神经细胞的损伤。

1.4 Huc-MSCs分泌的HGF可发挥对冈田酸诱导的AD细胞损伤的保护作用

使用raybiotech蛋白芯片检测了三种不同脐带来源的Huc-MSCs 培养上清中174个已知细胞因子的蛋白表达水平。聚类分析结果显示不同组别间出现显著差异的蛋白(图4A)。进一步筛选其中荧光信号值大于1000的因子，最终确定了18个表达信号最强的因子(图4B)。在详细研究和分析各因子的作用后，从18个表达信号最强的因子筛选出四个可能参与损伤修复的因子（IL-6、HGF/hepatocyte growth factor 、Ang和GRO）。补充实验发现仅HGF可恢复受损的原代神经元。

为了探讨Huc-MSCs分泌的HGF是否参与Huc-MSC介导的神经损伤的修复，在MSC处理组中加入抗HGF的中和抗体(HGFAb)。结果表明Huc-MSCs分泌的HGF在Huc-MSCs介导的神经损伤修复中发挥重要作用（图4C-I)。