Western Blot常用数据库网站介绍

不少研究者可能总是将注意力集中在抗体和实验操作上，常常忽略自身样本的原因，其实呢，样本制备也是需要尤为注意的。好的开始是成功的一般，磨刀不误砍柴工，不要等到做过实验了才发现做错了。

今天我们来详细讲讲动手之前你要做的事——查样本！

首先请先回答一下以下问题：

确定您所用的细胞／组织中表达您的靶标蛋白么？

表达丰度如何？

是否在WB的检测范围内？（目前认为WB的有小检测下线为0.1-1ng）

靶蛋白的亚细胞定位是哪里？靶蛋白分子量是多少？

是否需要特殊刺激才会表达？

是否在疾病组织或细胞中才会有表达？

是否有多种异构体？

是否有多种翻译后修饰形式？

什么？不知道？那恐怕要走很多弯路了。来看看你是不是锦鲤体质吧，不然你可能要费时费力费经费了。

查阅相关文献，这是实验之前必须要做的事情，NCBI（www.ncbi.nlm.nih.gov）应该不需要多介绍了吧，不了解的小伙伴赶紧了解起来。除此以外还有很多网络工具帮助您了解您的靶蛋白。

www.biogps.org 通过mRNA表达水平给您参考估计不同样本中目的蛋白的表达水平；样本种属可以选择人、小鼠、大鼠等。还可以链接其他的数据库；

www.proteinatlas.org简称HPA数据库，提供人类蛋白质在组织和细胞的分布，并用免疫组化技术。这是一个大规模蛋白质研究项目，主要目的是绘制人体组织和细胞中表达基因编码的蛋白位置。不过这个网站只针对人类蛋白质。

www.uniprot.org 了解目的蛋白的基因名、别名、功能、可变剪切体、蛋白表达位置、可修饰类型等；

亚细胞结构：

可变剪切体：

翻译后修饰情况：

www.phosphositeplus.org 是蛋白质翻译后修饰权威数据库，查阅修饰类蛋白的表达条件和丰度、刺激方式等；

web.Expasy.org主要包括蛋白质序列，构造及2-D PAGE (Two-dimentional polyacrylamide gel electrophoresis ) 的多个重要资料库，以及蛋白质序列和构造工具，FTP Server 和相关讯息。

openi.nlm.nih.gov

Openi是美国国立卫生研究院开发的科研图片数据库，其搜索出来的结果全部与生物医学相关。我们输入关键词NF-κB，点击搜索。可以看到与NF-κB相关的免疫组化、免疫印迹、荧光染色和信号通路图等。

PMC Images，www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/

PMC Images 也是美国国立卫生研究院旗下的图片数据库。以前的PMC Images没有独立的查询网站，其搜索结果伴随着Pubmed的检索而出现。现在可以通过登录https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/直接进入PMC Images搜索页面。

www.citeab.com

CiteAb是国际知名的抗体搜索引擎，用抗体的引用数量(citations)来进行抗体排名，确保抗体排名完全透明公正该平台目前包括来自159个供应商的370多万抗体，引用数量为140多万。

科研之路任重而道远，谨慎而细微。

实验者首先要对自己的实验有总体的把握，有清晰的思路，有详尽的准备，才可能得到一个漂亮的结果，否则只是重复一次又一次的失败，最后在失败中寻找偶然的成功。

希望这些网站帮助您更好地完成实验，如需要更多网站信息，更多详细操作和解读，可联系我们。