干货开讲 | 人/小鼠巨噬细胞整体解决方案

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背景

巨噬细胞 (Mφ) 为吞噬细胞,源自单核细胞,参与机体的先天性免疫和细胞免疫。是先天性免疫应答的关键效应细胞,他们表面表达多种模式识别受体,条理性受体和细胞因子受体。具有杀伤清除病原体和肿瘤细胞,参与炎症反应,抗原提呈以及免疫调节作用。


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发育

巨噬细胞的发育与单核细胞和树突状细胞密切相关,它们是单核吞噬细胞系统的一部分。一般来说,巨噬细胞由骨髓中的单核细胞发育而来,但它们也可以直接从局部前体在外周组织中补充自身。


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功能

巨噬细胞存在于大部分组织中,因此具有不同的功能。

主要功能是分为下面几点:

1.免疫监视;2. 细胞因子产生;3. 抗原提呈;4. 肿瘤浸润;5. 伤口愈合和组织重塑;6. 吞噬作用;7. 细胞毒性;


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巨噬细胞分离

1. 人全血样本

当从人全血中分析或处理巨噬细胞时,常用步骤是分离单核细胞并且将其分化为巨噬细胞。使用Ficoll分离PBMC,然后用CD14磁珠(美天旎,130-050-201)分离单核细胞,然后可使用Human M1 Macrophage Differentiation Kit(R&D, CDK012)或者Human M2 Macrophage Differentiation Kit(R&D, CDK013)诱导其向M1/M2型巨噬细胞分化。

2. 小鼠腹腔巨噬细胞

CD11b Microbeads (130-126-725) + F4/80 Microbeads (130-110-443)


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巨噬细胞体外分化

当准备用THP-1细胞诱导巨噬细胞时,可以用 PMA(佛波酯,福麦斯,FMS-FZ207)刺激6小时,诱导细胞分化为M0巨噬细胞。

另外,可以用不同的细胞因子先后刺激M0巨噬细胞来获得M1和M2极化巨噬细胞。可分别通过IFN-γ (Peprotech)和LPS (Sigma)培养48小时以上,使其向M1极化,或者IL-4(Peprotech)和IL-13(Peprotech)培养48小时以上,使其向M2极化。


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创建时间:2022-12-23 10:23