分选CD45 (TIL)?遥遥领先!
什么是肿瘤浸润淋巴细胞
肿瘤浸润性淋巴细胞 (Tumor Infiltrating Lymphocytes, TILs) 是指离开血液进入到肿瘤中的淋巴细胞,为肿瘤微环境中的一大重要组成部份。近十年来,TILs愈来愈受关注,因为科学家们发现这些细胞可识别非特定的多种癌细胞。因此对TILs的基因标志物及相关蛋白的分析,为我们提供线索了解癌症疾病的进展,对肿瘤预后或预测具有重要意义,甚至可成为一项细胞治疗的手段。
TIL在肿瘤微环境的作用
由于在肿瘤中T细胞的存在和功能有不少争议,因而近期的研究数据在多种不同肿瘤类型中强调肿瘤免疫浸润中细胞成分的多样性,如B细胞,NK细胞,M1和M2巨噬细胞,粒细胞或肥大细胞。TIL细胞中存在B细胞也视为预后的生物标志物,浸润性NK细胞也被证实具协同抗肿瘤效果。而今,这些免疫细胞的协同相互作用,才真正是对抗肿瘤反应的关键点,因此肿瘤免疫研究与肿瘤免疫治疗方法学是当今热门领域。
美天旎基于在免疫学及肿瘤学领域的深厚知识积累和创新技术平台,提供包括组织保存、组织解离、细胞分选在内的完整TIL样本处理方案,帮助研究人员从复杂的实体肿瘤组织中精确寻找到并深入分析那个“他”。
如何保存肿瘤组织
美天旎已经开发了MACS组织储存液(130-100-008),以允许优化储存新鲜器官和组织样本长达48小时而不显示背景效应,如细胞活化或凋亡诱导。它已在包括肿瘤、皮肤、心脏、脾脏、大脑和骨骼肌在内的多种人体和小鼠组织上进行了测试和验证。
如何有效解离回收活性细胞
人肿瘤解离试剂盒Tumor Dissociation kt, human130-095-929)带来省时高效优质的人实体肿瘤组织单细胞悬液制备,满足肿瘤细胞及肿瘤浸润白细胞的下游研究。该过剂盒对常见的超过200 种细胞表面抗原进行内部验证,超过 96% 的表面抗原不受任何影响。支持原发肿瘤、肿瘤转移灶、肿瘤活组织检验样本、人肿瘤异种移植物 (PDX) 等多种形式肿瘤样本,在多种组织来源肿瘤得到验证。
您可以配合使用gentleMACS组织解离器和肿瘤解离试剂盒,运行经优化及验证的解离程序,在机械扰动和酶解消化的双重作用下,温和解离肿瘤组织,可以高得率地回收表面抗原和功能都完好的TIL。
样本针对性的磁分选富集
TIL的数量和组成在不同肿瘤和个体中差异很大,进一步增加了TIL亚群的分析难度。在处理队列样本时,仅仅使用流式细胞仪对TIL进行免疫分型也非常耗时,且数据处理工作繁重。因此,预富集有助于提高TIL分析灵敏度,并为测序和流式分析等后续实验节省大量的时间和人力。
美天旎提供针对从实体肿瘤组织中分选淋巴细胞这一应用优化的磁珠,有别于针对血液样本优化的磁珠,可以分离到高纯度的TIL,还可在autoMACS Pro全自动磁性细胞分选仪上使用,进一步提升操作的标准化和结果的可靠度。
上表是对两个人源结肠癌异种移植样本的解离悬液分别使用美天旎人CD45 (TIL) MicroBeads和人CD45 MicroBeads的分选结果,前者分选后的阳性组分中TIL的占比大大高于后者。
上图是使用CD45(TIL)磁珠,LS柱和QuadroMACSTM Separator从单细胞悬浮液中分离CD45+ TIL,用CD45-PE-Vio®770荧光染色细胞,并使用MACSQuant®分析仪通过流式细胞术分析出的结果。
选对工具,事半功倍
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