轻松学会 | 用 Image J 定量分析免疫组化图
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ImageJ 安装包:
https://pan.quark.cn/s/c31e3a3b8807
定量分析免疫组化图详细步骤
Step 1:打开Image J软件,点击【File】-【Open】

从文件夹中选择打开待分析的图片。

Step 2:选择【Image】-【Type】-【选择“RGB stack”】,图片由彩图变为黑白图。


Step 3:【调节对比度】—【调节图片最下方的滑轮,调节对比度(一般调节到中间或最右侧)】

Step 4:菜单栏选择【Image】-【Adjust】-【Threshold】


Step 5:将如下图红框位置中【Default】中选为【“Red”】

用滑轮选择阳性信号区域。

Step 6:点击【Set】-【OK】

Step 7:菜单栏点击【Analyze】-【Set measurements】

接着选定如下所需参数,选择完参数之后点击【OK】

Step 8:菜单栏选择【Analyze】-【Measure】

面积和面积比就出来了,包括累积光密度值IntDen(Integratedoption density,IOD)。IOD值与目的蛋白的总量成正比,IOD值除以目的蛋白分布区域面积(IntDen/Area),得到平均光密度值。AOD(AverageOptical Density),通过AOD值作统计图,即可比较蛋白表达量的差异。
公式:AOD(%Area)=IOD/Area
% Area即为我们所需的结果。

END
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