8色、10色方案 | 检测C57/6小鼠T细胞的naïve、活化、记忆和效应亚群等

本方案可检测C57/6小鼠T细胞的naïve、活化、记忆和效应亚群,同时还可以检测免疫检查点蛋白表达水平。该方案可用于做CD45.1/CD45.2同系小鼠T细胞过继性移植后T细胞活化状态、细胞功能检测和免疫检查点检测,其他同系的小鼠或没有相应品系标记的小鼠也适用。该方案适用于普通脾脏细胞、或者皮下移植的小鼠结肠癌(MC38)中浸润的T细胞。同时该方案也适用于其他任何小鼠来源的T细胞样本检测。

01
方案概述

02
BD LSR Fortessa X20流式细胞仪信息

03
Panel

04
电压及其补偿
Panel 1 电压及其补偿

Panel 2 电压及其补偿

05
圈门策略


#
A:免疫细胞
在细胞分析过程中,首先利用FSC/SSC参数排除碎片,FSC-A/FSC-H参数排除粘连体,接着通过PI/SSC参数筛选并排除死细胞,并通过CD45.2选择免疫细胞。
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B-C:髓系细胞
B图先通过CD11c把DC排除掉,接着选择CD11b+细胞,之后通过Ly6C和Ly6G分出中性粒、单核、巨噬细胞,巨噬细胞中CD206+部分为alternatively activated macrophages (AAMs) 。C图则是选择CD11c+MHCII+的DC,并通过CD11b的表达将其细分为淋巴样DC和髓样DC。
#
D-F:TBNK细胞
在CD45.2+的免疫细胞中,还可通过CD19和TCRβ分为CD19+的B细胞和TCRβ+的T细胞,在CD19-TCRβ-区域中,存在一类CD49b+NKp46+的NK细胞。T细胞可进一步根据CD4和CD8 分为辅助T和细胞毒性T,这两个亚群根据CD44和CD62L区分出初始、记忆、效应三个功能状态。

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